Obtenção e estudo das propriedades de anticorpos monoclonais anti-TNP para uso em ensaios imunoenzimáticos (ELISA) (1999)
- Authors:
- Autor USP: LEO, PATRICIA - BIOTECNOLOGIA
- Unidade: BIOTECNOLOGIA
- Subjects: ANTICORPOS MONOCLONAIS; ELISA; HIBRIDOMAS; CÉLULAS; CÉLULAS CLONAIS; PROTEÍNAS G; MIELOMA ANIMAL; CAMUNDONGOS; CITOCINAS
- Language: Português
- Abstract: Setenta e um hibridomas secretores de AcM anti-TNP foram obtidos após a fusão de células de mieloma SP2 Agl4/0 com células esplênicas de camundongos BALB/c, imunizados com TNP-OVA. Quinze desses hibridomas foram expandidos em cultura e comotumores ascíticos, em camundongos histocompatíveis. Todos os clones expandidos secretavam anticorpos do isotipo lgG. Cinco dos AcM anti-TNP foram purificados em Sepharose-Proteína-G, partir dos líquidos ascíticos. A seguir, os anticorpospurificados foram conjugado à HRPO. Dois dos conjugados obtidos foram testados em ELISA para a detecção de IL-4 e INF-y, nos quais um dos anticorpos anti-citocina foi quimicamente acoplado ao TNP. Os conjugados anti-TNP/HRPO foram capazes derevelar, de maneira dose dependente, ambas as citocinas em seus ensaios específicos. As curvas extraídas desses ensaios apresentaram coeficientes de correlação linear (r IND. 2 próximos da unidade e foram comparáveis às obtidas com o sistemaclássico d revelação (Biotina-Estreptoavidina/HRPO). Estudos de crescimento celular de um dos hibridoma anti-TNP (clone lB2.lB6) mostraram que, nas condições avaliadas, a sua velocidade específica máxima de crescimento foi O,042 h IND. 1 e o tempo de duplicação foi 16,5h. A liberação do AcM por esse híbrido acompanhou o crescimento celular e atingiu a concentração média de 47u/mL após 60 horas do início do cultivo
- Imprenta:
- Data da defesa: 31.03.1999
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ABNT
LEO, Patrícia. Obtenção e estudo das propriedades de anticorpos monoclonais anti-TNP para uso em ensaios imunoenzimáticos (ELISA). 1999. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 1999. . Acesso em: 18 abr. 2024. -
APA
Leo, P. (1999). Obtenção e estudo das propriedades de anticorpos monoclonais anti-TNP para uso em ensaios imunoenzimáticos (ELISA) (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Leo P. Obtenção e estudo das propriedades de anticorpos monoclonais anti-TNP para uso em ensaios imunoenzimáticos (ELISA). 1999 ;[citado 2024 abr. 18 ] -
Vancouver
Leo P. Obtenção e estudo das propriedades de anticorpos monoclonais anti-TNP para uso em ensaios imunoenzimáticos (ELISA). 1999 ;[citado 2024 abr. 18 ] - Construção, produção e caracterização do retrovírus policistrônico pCLp16 POT.IRESp53SN
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